tlc试验中,可以进行不同展开剂的展开,并比较Rf值,说明原因

生物化学实验一:可溶性糖的硅膠G薄层层析

1. 学会薄层板的制备方法和薄层层析操作

2. 学会比移值Rf的测定方法

层析法又叫色谱法,是分离、提纯和鉴定混合物各组分的一种偅要方法有极广泛的用途。它是一种物理化学分离方法利用混合物各组分的物理化学性质的差异在两相间的分配比不同而进行分离。其中一相是固定相另一相是流动相。常用的色层分离法有薄层层析、柱层析、纸层析和气相色谱法等

Chromatography)常用TLC表示,兼有柱层析和纸层析嘚优点是近年来发展起来的一种微量、快速而简单的分离方法。它是将吸附剂(固定相)均匀地铺在一块玻璃板表面上形成薄层(其厚度一般為0.1mm~2mm)在此薄层上进行色谱分离。由于混合物中的各个组分对吸附剂的吸附能力不同当选择适当的溶剂(被称为展开剂,即流动相)流经吸附剂时发生无数次吸附和解吸过程,吸附力弱的组分随流动相向前移动吸附力强的组分滞留在后,由于各组分具有不同的移动速率被流动相带到薄层板不同高度,最终得以在固定相薄层上分离这一过程可表示为:

化合物在固定相K化合物在流动相平衡常数K的大小取决於化合物吸附能力的强弱。一个化合物愈强烈地被固定相吸附K值愈低,那么这个化合物随着流动相移动的距离就愈小

薄层层析除了用於分离外,更主要的是通过与已知结构化合物相比较来鉴定少量有机物的组成此外,薄层层析也经常用于寻找柱层析的最佳分离条件試样中各组分的分离效果可用它们比移值R

值是某组分的色谱斑点中心到原点的距离与溶剂前沿至原点距离的比

值一般在0~1之间,当实验条件严格控制时每种化

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